马萨乔的代表作为佛罗伦萨卡尔米内教堂的布兰卡奇礼拜堂壁画（1425～1428）、圣玛丽亚诺韦拉教堂的《三位一体》祭坛画（约1427），以及为比萨的卡尔米内教堂作的一组多屏祭坛画（1426，分藏于伦敦、柏林、那不勒斯等地）。布兰卡奇礼拜堂壁画最初由画家马索利诺绘制，马萨乔后来参与协作（他俩时常合作），其间马索利诺一度赴匈牙利作画，因此有几幅完全出自马萨乔一人之手。这些壁画虽仍为宗教题材，却以合乎科学法则的写实手法表现，人物坚定沉着、朴实无华，洋溢着人文主义精神。如《纳税钱》，表现罗马税吏向耶稣收税的故事，画面以中央的基督及其门人群像为主，全面透视焦点集中于基督头部，光线和礼拜堂窗口进光方向一致，构成了前所未有的富于真实感的效果。《三位一体》祭坛画则以极为杰出的建筑背景的透视表现著称，人物描绘除发挥马萨乔固有的雄浑朴实风格而外，还注意了三角形构图的稳定，被认为是其最成熟的作品。马萨乔通过这些作品显示了文艺复兴绘画的基本特色：现实主义表现手法与人文主义精神内容的统一，对日后影响极大。他虽由于过早去世无直传弟子，但整个15世纪佛罗伦萨画派皆承袭他的传统，盛赞布兰卡奇礼拜堂为所有艺术大师之学校。